▎關于Swant

瑞士Swant（Swant AG）是一家長期聚焦于鈣相關蛋白抗體與抗原研發生產的生物企業，總部位于瑞士，核心團隊將數十年精力投入到一個看似狹窄、實則極其關鍵的生物學方向上——鈣結合蛋白及其相互作用分子的免疫學檢測工具。

在細胞生物學和神經科學中，鈣離子（Ca2?）作為第二信使參與的信號通路覆蓋了從神經沖動傳導、肌肉收縮、激素分泌，到細胞凋亡、基因轉錄調控等大量生命過程。而鈣結合蛋白（Calbindin D-28k、Calretinin、Parvalbumin等）正是這些信號事件中的傳感器與緩沖器。要在組織切片中看清它們在哪里、在什么細胞類型中表達；要在蛋白水平上確認它們的豐度變化——就需要特異性強、效價穩定、可重復性好的免疫學試劑。

Swant所做的，正是為這一需求持續提供經過驗證的單克隆與多克隆抗體工具，以及配套的高純度重組抗原蛋白。經過多年的積累，Swant的抗體產品已在大量同行評議文獻中被采用，尤其在腦組織分型、神經元亞群標記、神經膠質細胞鑒定、鈣信號相關蛋白定位等研究方向形成了相對穩定的使用者群體。

▎核心優勢

① 方向聚焦，產品線圍繞"鈣結合蛋白"體系搭建

Swant不是大而全的通用抗體工廠，而是圍繞鈣生物學這條主線，把幾個關鍵分子的抗體做出深度：

• 鈣結合蛋白系列：Calbindin D-28k、Calretinin、Parvalbumin、Calmodulin、Oncomodulin、S-100β、S100A6等；

• 鈣轉運與泵控系統：Na?-Ca2?交換子（NCX）蛋白抗體、質膜Ca2?-ATPase（PMCA1～4）抗體；

• 神經活性物質相關：GABA抗體、Glutamate抗體；

• 內分泌/生長因子軸：IGF-1、IGF-2抗體；

• 腎素-血管緊張素系統：Renin、Angiotensinogen抗體；

• 重組抗原蛋白：提供經HPLC/FPLC純化級別的Calbindin D-28k、Calretinin、Parvalbumin、Calmodulin、S-100β等重組蛋白，用于陽性對照、標準品或包被抗原用途。

這種聚焦策略的好處在于：每一款主力抗體都在其目標應用場景中被反復打磨過，而不是廣撒網式的"鋪貨型"產品列表。

② 抗體以高濃度培養上清凍干形式供應，兼顧穩定性與用量靈活性

Swant的經典抗體多以濃縮培養上清（conc. supernat.）凍干（lyophilized）形式提供，也有部分腹水來源（ascites）制備的批次。凍干形式在避光、低溫條件下可以較好地維持抗體活性，同時便于運輸和長期儲備；復溶后可根據實驗類型與信號強弱，摸索合適的稀釋倍數。

③ 可用于高稀釋倍數下的免疫組化（IHC），適合連續切片染色方案

Swant的抗體在ABC法（Avidin-Biotin Complex）等常見IHC體系中，有資料記載可在超過1:5,000倍甚至更高稀釋度下仍獲得可用的信噪比（具體最佳稀釋比需按各實驗室固定流程重新滴定）。這意味著一支200 μL的抗體管在實際使用中往往能支撐大量切片，對于需要跑批量染色、做多組比較的實驗設計而言，有一定實用價值。

④ 重組抗原蛋白經HPLC/FPLC純化，可作為方法學驗證的補充材料

除了抗體本身，Swant同時提供對應靶點的重組蛋白，這對于以下場景尤其有用：

• Western Blot中跑一塊陽性對照泳道，確認抗體識別條帶的預期分子量；

• IHC/ICC中設置吸附實驗（pre-absorption）對照，評估染色特異性；

• ELISA或體外結合實驗中的包被抗原/標準曲線原料。

⑤ 跨物種適應性的實際意義——人源組織的適用性

Swant的Calbindin D-28k、Calretinin、Parvalbumin等關鍵抗體，在多種脊椎動物（包括人、大鼠、小鼠等）的樣本中都有文獻使用記錄，特別是對人腦組織亞區神經元分型的支持，這是很多實驗室選擇它們的原因之一。

▎熱門產品介紹

一、抗Calbindin D-28k 單抗

? 品名  

Calbindin D-28k（鈣結合蛋白D-28k）小鼠單克隆抗體，IgG1亞型

? 產品特點  

• 靶標分子量約28 kDa的可溶性鈣結合蛋白，主要在一類特定神經元亞群（如小腦浦肯野細胞、部分大腦皮層中間神經元、齒狀回顆粒細胞、部分感覺神經元）以及某些非神經組織中表達；

• 以濃縮培養上清凍干粉末或純化腹水來源提供，適用于多種免疫檢測平臺；

• 在免疫組化中呈現細胞質與部分樹突區域的細膩染色特征，背景相對干凈，適合做連續切片的細胞類型定位。

? 存儲條件  

• 收到凍干粉后建議短期內不開啟的情況下，存放于2～8 °C避光干燥環境；

• 一旦復溶（通常加入指定體積的超純水或含穩定劑的緩沖液，以說明書標注為準），應分裝為若干小管，存放于-20 °C（非反復凍融）；

• 工作中稀釋液建議現配現用或4 °C短期保存（≤1周），避免污染。

? 工作原理  

Calbindin D-28k作為EF-hand結構家族成員，其空間構象在不同物種間保守程度較高。該單抗通過識別Calbindin D-28k特異的構象或線性表位，在組織切片或膜上形成抗原-抗體復合物；隨后借助二抗（抗小鼠IgG）+ 顯色系統（HRP-DAB化學顯色或熒光二抗）將結合信號轉化為可視化的棕褐色沉淀或熒光信號，從而標記出哪些細胞、哪些區域含有該鈣結合蛋白。

? 使用方法（以石蠟切片IHC為例的典型流程框架）  

1. 切片準備：組織經合適固定劑（常用4%多聚甲醛/PFA）灌注固定或后固定→梯度酒精脫水→二甲苯透明→石蠟包埋→切片貼附于帶電荷或APES處理玻片；  

2. 脫蠟復水：二甲苯×2 → 遞減酒精系列→蒸餾水洗；  

3. 抗原修復：根據經驗選用檸檬酸鈉緩沖液（pH 6.0）或EDTA緩沖液（pH 9.0）的熱誘導修復（HIER：pressure cooker或microwave/sub-boiling），這一步對核內/胞質鈣結合蛋白的暴露尤為關鍵；  

4. 內源性過氧化物酶阻斷：3% H?O?（甲醇或PBS配制），室溫10～15 min；  

5. 封閉：含5～10%正常血清（與二抗同源）的緩沖液 + 0.1～0.3% Triton X-100（視穿透需求定），30 min～1 h；  

6. 一抗孵育：按預試滴定好的稀釋比（文獻參考范圍常在1:1,000～1:10,000區間，但必須以自身系統做梯度滴定）用抗體稀釋液（PBS/0.1% BSA/0.3% Triton）稀釋，4 °C過夜或室溫2 h；  

7. 二抗與信號放大：生物標記抗小鼠IgG → ABC復合物 → DAB顯色（或熒光二抗直標方案跳過DAB步驟）；  

8. 復染、封片、鏡檢（水性封片劑用于熒光，DPX/中性樹脂用于DAB）。

二、抗Calretinin 單抗

? 品名  

Calretinin 小鼠單克隆抗體

? 產品特點  

• Calretinin同樣屬于EF-hand鈣結合蛋白家族，分子量約29 kDa，在特定皮層/海馬中間神經元、視網膜雙極細胞、內耳毛細胞、部分感覺神經節等位置有特征性分布；

• 該抗體常用于神經元亞型分型方案中，與Parvalbumin、Calbindin D-28k搭配組成"三色/三標"或連續切片標記組合，幫助區分抑制性中間神經元的譜系歸屬；

• 在人組織樣本中，Calretinin也對某些間皮細胞及間皮瘤相關標記有交叉討論價值（需結合形態與多標確認）。

? 存儲條件  

同前述凍干抗體的一般原則：2～8 °C干燥避光未復溶；復溶后分裝-20 °C保存，避免反復凍融。

? 工作原理  

Calretinin在細胞內以可溶胞質蛋白形式存在，因此多數情況下不需要強變性條件即可被抗體接觸。單抗結合后通過二抗/酶標系統級聯放大，使目標神經元胞體與突起呈現出與周圍細胞可區分的顯色或熒光輪廓。

? 使用方法  

流程與上述Calbindin D-28k基本一致。需要注意的是：

• Calretinin對某些修復條件較敏感，EDTA pH 9.0的HIER方案（pressure cooking約2～3 min持壓）在很多人的操作中表現穩定；

• 若做多標免疫熒光，建議將Calretinin與另兩種標記錯開宿主物種來源（或采用間接法的TSA多輪放大方案/直接偶聯一抗方案），減少交叉反應干擾。

三、抗Parvalbumin 單抗

? 品名  

Parvalbumin（PV）小鼠單克隆抗體

? 產品特點  

• 分子量約12 kDa的小分子EF-hand鈣結合蛋白，在快速放電型（fast-spiking）抑制性GABA能中間神經元中表達豐富（如大腦皮層、海馬CA1的籃狀細胞能中間神經元等），也見于骨骼肌與某些感覺系統；

• 因分子量偏小，石蠟切片中若固定過度或修復過度，可能出現表位遮蔽或彌散丟失，因此對固定時長與修復條件的控制更為敏感；

• 常與Calretinin、Calbindin D-28k以及GABA等組合，用于繪制"抑制性回路圖譜"。

? 存儲條件  

凍干粉：2～8 °C，干燥避光；復溶后分裝 -20 °C，盡量減少凍融循環。工作中4 °C可短暫放置。

? 工作原理  

Parvalbumin的胞內定位以細胞質為主，由于是小分子可溶性蛋白，在良好滲透條件下可較好地被抗體浸潤。一抗結合后經酶聯或熒光二抗可視化，即可在切片上讀出PV陽性神經元密度、分布形態、突起網絡等信息。

? 使用方法要點  

• 固定建議控制在合理窗口內（例如4% PFA灌注固定數小時至過夜，避免過度交聯）；  

• 抗原修復常用檸檬酸鹽pH 6.0（低壓鍋或水煮法），亦可試驗EDTA pH 9.0作對比；  

• 一抗稀釋比同樣需要自身系統滴定——PV抗體在優化條件下可以用到相當高的稀釋倍數，但前提是背景控制到位（封閉血清種類、Triton濃度、內源性過氧化物酶清除質量都要匹配）。

四、抗Na?-Ca2?交換子蛋白（NCX/Cardiac NCX）抗體

? 品名  

Na?-Ca2? exchanger protein（NCX）小鼠單克隆抗體

? 產品特點  

• NCX是位于細胞膜上的雙向逆向轉運體，利用鈉離子梯度排出胞內多余鈣離子，在心肌細胞、神經元、腎細胞等興奮細胞中起關鍵穩態作用；

• 抗體靶點多設計于胞內環域（loop domain）或C端區域，適合Western Blot（還原條件下）與固定后透化免疫熒光；石蠟IHC的可行性取決于表位是否耐受固定交聯。

• 產品可作為研究心臟電生理、神經元鈣穩態調控、缺血再灌注損傷模型的材料之一。

? 存儲條件  

凍干品：2～8 °C干燥避光；復溶后分裝 -20 °C保存；工作液4 °C短期。含甘油的防凍版本（如有）可按說明書低溫冷凍。

? 工作原理  

NCX作為跨膜多次的蛋白，其胞內片段在通透化處理后暴露于抗體。一抗識別特定表位后，通過二抗-HRP或熒光二抗實現可視化。在WB中表現為預期分子量附近的條帶（注意糖基化與剪切變體可導致條帶遷移偏移，需結合陽性對照判斷）。

? 使用方法  

• WB：組織/細胞RIPA裂解→BCA定量→SDS-PAGE→轉PVDF/NC膜→5%脫脂奶或BSA封閉1 h→一抗4 °C過夜→TBST洗→二抗→ECL顯影；  

• IF/IHC：需保證透化（0.1～0.3% Triton X-100）與封閉充分；心肌組織因富含內源性生物與過氧化物酶，建議加做內源性生物阻斷（Avidin/Biotin blocking kit）及延長H?O?處理。

▎Swant的試劑，解決你實驗中的哪些問題

1. 神經元亞群分型時缺乏可靠的細胞類型標記  

當你的研究對象是"中間神經元有哪些亞型""不同腦區的抑制性回路如何分布""某種干預后特定神經元譜系是否改變"——你需要一組在本地固定條件下能穩定給出干凈信號的亞型標記抗體。Calbindin D-28k / Calretinin / Parvalbumin 這三類經典標記之所以被長期沿用，正是因為它們的表達分區相對穩定、胞質染色模式容易辨認。

2. 鈣信號相關蛋白的定位數據與WB定量需要互相印證  

用Fura-2/GCaMP等手段拿到鈣動態之后，下一步常常要問"到底是哪類細胞在驅動這個信號"——PMCA與NCX抗體讓你在組織原位看到鈣外排機器的空間分布，和功能性鈣成像形成互補。

3. 人腦組織或臨床病理標本的標記需求  

人源樣本中很多抗體交叉反應性會下降。Swant的上述幾款鈣結合蛋白抗體在多篇涉及人腦、人腫瘤（如間皮瘤中Calretinin的討論）的文獻中出現，為需要在人源材料中做驗證的課題組提供了一條已有先例的路線。

4. 抗體效價不穩定導致染色批次間差異大  

Swant以凍干濃縮形式供應的設計在一定程度上減緩了"液態抗體在反復開管中活性漂移"的問題——前提是你做好復溶后的分裝紀律。

5. 需要配套重組抗原做嚴謹的抗體驗證  

如今期刊對抗體驗證的要求趨嚴（參見RRID與抗體驗證工作組的原則），有對應重組抗原可跑陽性對照與吸附實驗，等于給你的數據多一層可追溯的證據鏈。

▎購買Swant產品——常見疑問與解答

Q1：Swant的抗體都是小鼠單抗嗎？能不能做多色熒光里和我的兔一抗搭配？  

A：Swant的主力產品線以小鼠來源單克隆抗體（IgG1/IgG2A/IgG2B/IgG3依克隆號而定）為主。如果你的另一支關鍵抗體也是小鼠來源，那么在同一張切片上直接做間接法雙標就會產生二抗交叉識別。解決路徑包括：①將其中一個標記改用直接偶聯一抗（F(ab')?-level conjugation）跳過二抗步驟；②采用TSA-酪胺信號放大系統的多輪染色方案（每輪結束后用強洗脫液去除一抗/二抗復合物但保留HRP沉積信號）；③將其中一者的IHC留作相鄰連續切片單獨染色比對。具體選哪條路，取決于你實驗室已有的二抗體系和染色設備。

Q2：凍干粉收到后，用什么復溶液？復溶后能放多久？  

A：具體復溶體積與推薦緩沖液組成務必以隨瓶說明書為準（常見做法是加入指定μL的超純水或含0.1%BSA的PBS）。復溶后強烈建議分裝（例如10～20 μL/管）存-20 °C，每次實驗取一管融化使用；不要整管反復從-20取出→化凍→放回。工作中稀釋好的工作液一般4 °C可撐當天或數天，但不建議長期囤工作液。

Q3：我用Swant的Calbindin D-28k做石蠟IHC，怎么選抗原修復？  

A：這是一個沒有"正確答案"的參數。兩條最常見的修復路線是檸檬酸鈉pH 6.0和EDTA pH 9.0（HIER，壓力鍋或水煮法）。很多用戶的經驗是：Calbindin D-28k在EDTA pH 9.0高壓修復下信號更亮，但也更依賴背景控制（封閉血清濃度、內源性過氧化物酶清除、二抗來源純度）。建議第一次上新抗體時，做一個2×2小矩陣：修復緩沖pH 6.0 vs 9.0 × 一抗稀釋1:2,000 vs 1:5,000，用同一塊陽性組織（小腦是好的內置陽性對照——浦肯野細胞強陽性、顆粒層弱/陰），一眼就能選出你的系統優條件。

Q4：抗GABA抗體染色太淺 / 背景花，怎么辦？  

A：抗遞質抗體對固定的依賴是所有IHC里最"挑剔"的一類之一。如果你的固定只用4% PFA沒有戊二醛，遞質分子可能在漂洗與后續步驟中流失，導致信號弱。改善方向：①改用0.1～0.5%戊二醛 + 4% PFA灌注固定（戊二醛味大且有自發熒光風險，需要NaBH?后處理減熒）；②提高封閉液BSA到2%并降低一抗稀釋度（寧濃勿稀的思路）；③做吸附對照確認信號是不是真的遞質依賴；④考慮用GAD65/67（合成酶）免疫標記作為GABA能表型的補充證據，二者邏輯不同但互相支撐。

Q5：Parvalbumin染色在石蠟切片上總是"只有零星幾個細胞亮"，是抗體不行嗎？  

A：不一定。PV是小分子蛋白，對過度固定和過度修復都很敏感。排查順序建議是：①檢查原始固定方案（灌注固定是否及時、固定液是否新鮮、固定時長是4 h還是過夜以上）；②換修復條件做對比（檸檬酸鹽pH 6.0 vs EDTA pH 9.0，壓力鍋時間從短到長梯度試）；③確認陽性對照組織——小腦的浦肯野細胞通常不表達PV（注意這與Calbindin D-28k不同），但小腦白質中的籃狀/星形細胞及某些腦干運動核周圍有PV陽性信號，可用作內部參照；④如果仍只有個別細胞亮，考慮是否存在組織預處理溫度過高（如烤片>65 °C太久）導致小蛋白表位降解，可嘗試降低烤片溫度/縮短時間。

Q6：我做Western Blot，PMCA抗體出現了好幾條帶，怎么判斷哪個是對的呢？  

A：PMCA有多個基因（PMCA1～4）、可變剪接異構體、以及不同程度的糖基化修飾，因此在不同組織中的條帶圖譜不全一致。判讀原則：①看說明書提供的預期表觀分子量范圍（通常在120～140 kDa附近，但糖基化可讓部分條帶上移）；②一定跑陽性對照（推薦用Swant自家的重組PMCA片段蛋白或已知高表達組織裂解物）；③必要時用重組抗原做吸附對照——能被吸附走的條帶更可能是真實結合，不能被吸附的非特異帶則需要靠更嚴格的封閉條件（0.05% NaN?？不，NaN?會殺HRP——改為提高鹽濃度如300 mM NaCl + 0.1% Tween-20）來壓制。

Q7：Swant的抗體能不能用于流式細胞術（表面染色）？  

A：Swant的主力抗體多為針對胞內/胞質抗原（鈣結合蛋白、遞質、鈣泵胞內域等），因此在完整活細胞表面染色場景下通常不適用。如果想用于胞內流式（intracellular flow），需要做固定+透化預處理，且事先要驗證該克隆在透化條件下的結合行為與信噪比——這不是默認保證的用途，建議先小量試用以確認可行性再批量采購。

Q8：如果我想確認某支Swant抗體對應的RRID或文獻引用，去哪里查？  

A：可以在CiteAb、Antibody Registry以及PubMed中用靶標名稱（如"Calbindin D-28k Swant" / "Parvalbumin PV235 Swant"等）做組合檢索；Swant（swant.com）也會列出部分產品引用的代表性文獻方向供參考。采購時你也可以向供貨方索要該批次對應的已有驗證數據摘要。

Q9：訂購與售后技術支持由誰負責？  

A：在中國區，Swant品牌相關產品的咨詢、報價與供應服務，由上海起發實驗試劑有限公司作為特約代理經銷商提供服務支持，包括產品選型溝通、批次信息確認、到貨冷鏈物流跟蹤以及售后問題的對接反饋。

Q10：Swant的產品能否用于臨床體外診斷或人體治療？  

A：不能。Swant的抗體與抗原產品均標注為僅供科研使用（for research use only），不用于臨床診斷、治療或直接施用于人體。

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更多產品信息，請聯系瑞士Swant特約代理經銷商：上海起發實驗試劑有限公司

（注：本文內容基于品牌公開資料及行業常規信息整理，具體以品牌信息文檔為準。）

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